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新技术 | 采用新型分子诊断技术及多学科MDT协作 高水平诊治疑难“结核病”

作者:航天医院             点击数:791             2019/12/25 15:19:48

一年前,邻市的小王因痰中带血丝被当地医院诊断为肺结核,“对症治疗”许久未见好转。随之咳嗽、咳痰、咯血、胸痛等其他症状也慢慢出现,久治未愈让小王怀疑自己是不是得了什么怪病。

前段时间,他听闻贵州航天医院治疗肺结核效果非常好,便来到我院就诊,谁知医生告诉他,原来他得的不是肺结核,而是非结核分枝杆菌(NTM)肺病。


非结核分枝杆菌肺病易误诊为肺结核

据证实,非结核分枝杆菌(NTM)在形态上、抗酸染色等性状方面类似结核分枝杆菌,且NTM肺病临床症状及影像学表现与肺结核相似,早期极易被误诊。NTM具有相当高的天然耐药性,治疗时间长,治疗难度大,预后欠佳。我院呼吸与危重症学科主任廖江荣介绍,如小王的情况,按以往诊断方法来判断,CT检查发现肺部阴影,且痰抗酸杆菌涂片阳性等多考虑为肺结核。但再为患者作进一步检查,其分枝杆菌菌种基因鉴定提示为胞内分枝杆菌(NTM中的一种),遂予对症治疗3周后复查胸部CT显示病变明显吸收,好转出院。4个月后,痰培养转阴,痰涂片抗酸染色未查到抗酸杆菌。


我院采用最新分子诊断技术

只需2小时快速诊断结核病

结核病是由结核分枝杆菌(MTB)侵入人体后产生的一种具有强烈传染性的慢性消耗性疾病,在临床中很常见。结核病的传统诊断方法主要依靠临床表现、痰涂片、培养检测、胸部X线影像特征等,因试剂灵敏度低、阳性率低、人为或环境影响大、检测结果特异性低、耗时长,常存在漏诊或过诊现象。

由于大多数分枝杆菌生长非常缓慢,使用高度专业化的细菌培养和昂贵的高安全性实验室需几周才能完成,而采用最新的分子诊断技术,引起肺感染或结核的分枝杆菌病原体只需2小时便能被快速诊断,且该技术灵敏度高,能检测到的结核分枝杆菌最小量为1.0×104 copies/mL,可有效帮助患者迅速开始合适的治疗。


采用新型诊断技术作为利器

提高结核病患者的诊疗水平

为提高结核病诊疗水平,我院依托综合性医院的优势,建立有贵州省一流水平的分子诊断中心、呼吸疾病介入中心、呼吸与危重症学科,引进结核核酸检测技术(TB-DNA、NTM-DNA、TB-RNA)、结核γ-干扰素释放实验(TB-IGRA)、结核分枝杆菌耐药基因检测(PCR-反向点杂交技术)、分枝杆菌菌种基因鉴定(DNA微阵列芯片)、支气管肺泡灌洗、TBLB、TBNA技术、肺部疾病快速诊断(ROSE)平台等先进技术,推进MDT多学科协作,基础病、合并症、危重症诊治能力强,结核病专科诊疗水平达到贵州省领先地位,特别在分枝杆菌的菌种鉴定、耐药结核病的诊断上犹为出色。

贵州航天医院已成为目前遵义地区唯一同时配备以上分子诊断方法的医疗机构,不仅可以实现结核分枝杆菌的基因检测,确诊结核病,还可以与非结核分枝杆菌病进行鉴别,实现个体化治疗;同时,可以进一步检测耐药相关基因突变情况,对结核分枝杆菌5个耐药基因(rpoB、katG、inhA、embB、rpsL)的13种突变检测,可提供4种一线抗结核药物(利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇)的耐药信息。仅需6小时,可及时提醒临床采用更有效的治疗方案,避免了传统结核杆菌培养需要3~8周而导致诊断、治疗不及时的情况。


中心实验室简介

贵州航天医院中心实验室是集临床检测、科学研究为一体的开放性实验室,占地面积为560平方米,2016年获批为遵义市重点实验室,由临床基因扩增实验室、基因芯片室、测序分析室、结核重点实验室等构成。实验室可对疾病进行快速检测,为临床明确病因、指导合理用药、减轻患者医疗费用、节省医疗卫生资源发挥重要作用。

在实验室建设方面,目前已初步建成具有现代化规模的实验研究平台,现有仪器设备总值达1000余万元,重点装备分子生物学、细胞生物学和免疫学研究的各类仪器设备,包括Biosystems 3500xL Dx遗传基因测序仪、ABI 7500荧光定量PCR仪、SLAN-96P荧光定量PCR仪、Xpert_MTB-RIF荧光定量PCR仪、RTisochip恒温扩增微流控芯片核酸分析仪、全自动芯片杂交仪(BR-526-24型)、生物芯片识读仪(BE-2.0)、凝胶成像系统、ABI Veriti FAST梯度PCR仪等设备。

中心实验室技术力量雄厚,现有博士1名,硕士3名,实验室人员结构合理、梯队完整、各有所长。可开展细胞生物学、分子生物学和免疫学等各类实验,如基因克隆与表达、基因表达差异分析、蛋白质功能分析、细胞信号通路分析、细胞培养等。

近年来承担贵州省科学技术基金、贵州省卫生和计生委科研基金、贵州省中医药管理局科研基金、遵义市科技局社发攻关等科研项目14项。


已开展检测项目:

(1)荧光定量PCR: 

高灵敏度乙肝病毒和丙肝病毒核酸检测、结核DNA及RNA检测、结核Xpert  MTB/RIF检测、EB病毒、巨细胞病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体DNA检测和泌尿生殖道感染(淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人乳头瘤病毒6/11型、HSV-II型)及21种HPV病毒基因分型等基因检测项目。

(2)基因芯片平台

可一次性检测13种下呼吸道感染病原体:肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林葡萄球菌、大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、 铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、结核分枝杆菌复合群。

(3)个体化药物基因检测平台

HBV核苷类耐药基因突变及乙肝基因分型、结核分枝杆菌一线抗结核药物(利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇)耐药基因检测、氯吡格雷、叶酸、他汀类个体化药物基因检测和肺癌等肿瘤靶向药物基因检测。

(4)遗传病基因检测平台

①遗传性耳聋基因:先天性耳聋确诊;健康人群、孕前和产前耳聋基因筛查;药物敏感性耳聋、大前庭导水管综合征(PDS)患儿预警。

②α和β地中海贫血基因、Y染色体微缺失基因等项目。

(5)免疫学检测平台

高血压四项、早期胃癌筛查标志物胃蛋白酶原检测、肺癌标志物五项、γ-干扰素释放实验、病毒五联检等项目。

根据医院学科发展战略,中心实验室将以完善的各类病原体基因诊断、药物基因组学、肿瘤靶向&个体化治疗为重点发展方向,形成遵义地区具有特色的临床检测中心,更好地满足广大患者就医需要。

作者:马庆庆

审校:廖江荣




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